Medio de cultivo

Generalmente los medios de cultivo son soluciones sólidas o líquidas que contienen nutrientes en los que es posible cultivar células eucariotas y procariotas. Los medios de cultivo bacteriano, es decir, aquellos en los que es posible cultivar colonias bacterianas y otros procariotas, son más simples que los eucariotas. Para microorganismos fotolitotróficos autotróficos como las cianobacterias, el componente principal de un medio de cultivo es, por ejemplo, el CO 2. Un suelo se puede hacer sólido simplemente agregando 1.5% de agar agar. El Agar es un polisacárido estructural, extraído de un alga roja, que actúa como agente solidificante convirtiendo el suelo en gelatina, y que no es digerido por bacterias. Es muy útil cuando es necesario cultivar microorganismos en la superficie. Si sabemos qué organismo necesitamos aislar y conocer su metabolismo, podemos equipar el medio de cultivo con todos los nutrientes que el microorganismo necesita; para una correcta preparación del medio de cultivo, no se deben pasar por alto otros factores como el pH, la osmolaridad y la temperatura. Los elementos esenciales para el crecimiento de microorganismos son: C, H, O, N, S, P (contenido en aminoácidos, azúcares y ácidos nucleicos); hay otros elementos que no son fácilmente solubles y deben agregarse en forma de sal (forma más soluble de estos elementos): N, P, S, Mg, y otros se agregan solo en trazas: Fe, Ca, Co, Mn (que actúan como cofactores de algunas de las reacciones enzimáticas).

De acuerdo con las sustancias que contienen y sus concentraciones relativas, los medios de cultivo se clasifican como: medios sintéticos o definidos son aquellos cuya composición exacta se conoce. Casi siempre se preparan ad hoc en función de las necesidades nutricionales del microorganismo que se quiere cultivar. Por lo general, contienen un número definido de sustancias de concentración conocida. Algunos terrenos, sin embargo, son mucho más complejos. Estos tipos de suelo son ampliamente utilizados en la investigación, ya que a menudo se hace necesario conocer el sustrato que es metabolizado por el microorganismo que se desea cultivar. Los suelos complejos son aquellos cuya composición química no se conoce en detalle. Estos medios de cultivo son extremadamente útiles, ya que permiten cultivar simultáneamente especies con necesidades nutricionales muy diferentes o especies cuyas necesidades nutricionales aún no se conocen bien. Además de las sustancias "estándar" , los suelos complejos contienen:.

De acuerdo con la tarea que debe realizar un suelo, se distinguen: son suelos sin aditivos especiales, permiten el crecimiento y desarrollo de un gran número de especies bacterianas. Los suelos genéricos más utilizados son el agar nutritivo, el caldo nutritivo, el Agar triptico de soja y el Agar de recuento de placas. Generalmente se utilizan para el recuento total de bacterias. Son suelos ricos en nutrientes, a menudo con la presencia de sangre de oveja o caballo, rojo huevo, albúmina o mezclas químicamente definidas (por ejemplo, vitaminas o aminoácidos) que permiten el crecimiento de especies microbianas nutricionalmente exigentes. Ponen sangre o suero, para imitar mejor las condiciones que se encuentran en el organismo que alberga un determinado microorganismo. Son suelos que favorecen el crecimiento solo de especies bacterianas particulares gracias a la presencia de factores que inhiben el desarrollo de otras especies. Estos factores se denominan sustancias inhibitorias y pueden ser antibióticos, colorantes o sales. Algunos ejemplos de sustancias inhibidoras pueden ser: son suelos que, gracias a la presencia de componentes particulares, es posible distinguir entre diferentes grupos de bacterias, lo que permite la presunta identificación de las especies aisladas (como el agar MacConkey, el agar de sal de manitol, el agar MR - VP o el agar TSI). Los componentes presentes dentro de un suelo diferencial pueden ser: utilizados en muestras polimicrobiales, son suelos que permiten aumentar la carga de las especies bacterianas que nos interesa aislar, gracias a la presencia de factores que ralentizan el crecimiento de contaminantes de especies bacterianas presentes en la muestra bajo consideración. Un ejemplo de esto es la muestra de las heces donde se sospecha que hay una carga baja de Salmonella: puede usar las tierras de enriquecimiento en las que, al mismo tiempo, se le envía la flora colonizzante batteriostasi, mientras promueve la replicación de salmonella que a partir de una carga baja será tan obvio que puede aislarse en suelo sólido.

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